EBY100菌株是Invitrogen公司開(kāi)發(fā)的酵母展示用菌株，MATa型，與pYD1質(zhì)粒配套使用，可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進(jìn)行蛋白展示試驗(yàn)；Transformation marker為：leu2，trp1。EBY100-pYD1酵母展示系統(tǒng)通過(guò)釀酒酵母的a凝集素受體（a-agglutinin receptor）將目標(biāo)蛋白展示在細(xì)胞表面，方便后期篩選。其基本原理為：a凝集素受體由AGA1和AGA2兩個(gè)亞基組成，AGA1蛋白(725個(gè)氨基酸)由EBY100細(xì)胞合成，分泌到細(xì)胞外，在細(xì)胞外基質(zhì)中與酵母細(xì)胞壁的β-葡聚糖共價(jià)結(jié)合，AGA2蛋白(69個(gè)氨基酸)可以通過(guò)兩個(gè)二硫鍵結(jié)合到AGA1蛋白上；將目標(biāo)蛋白構(gòu)建到pYD1質(zhì)粒上，與AGA2蛋白融合表達(dá)，AGA2蛋白在N端，目標(biāo)蛋白在C端，當(dāng)含有pYD1質(zhì)粒的 EBY100 酵母菌在含有半乳糖，同時(shí)不含葡萄糖的培養(yǎng)基中誘導(dǎo)表達(dá)時(shí)可以表達(dá)出AGA2-target protein 融合蛋白，該融合蛋白通過(guò)AGA2結(jié)合到EBY100酵母細(xì)胞表面的AGA1蛋白上進(jìn)而將目標(biāo)蛋白展示在酵母表面。EBY100感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，-80℃可保存三個(gè)月，pGADT7質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>104cfu/μg DNA。
基 因 型：MATa AGA1::GAL1-AGA1::URA3 ura3-52 trp1 leu2-delta200 his3-delta200 pep4::HIS3 prbd1.6R can1 GAL
